GB 15193
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ID： |
1CB9651248924DF28422A3A7D9FDCCFC |
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文件大小(MB)： |
0.3 |
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4 |
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日期： |
2024-7-31 |
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ICS 07. 100,C 53,中华人民共和国国家标准,GB 15193J1 —2003,代替 GB 15193.11—1994,果蝇伴性 隐性致死试验,Sex-linked recessive lethal test,2003-09-24 发布2004-05-01 实施,中华人民共和国卫生部发布,中国国家标滙化管理委员会77,GB 15193.11—2003,刖百,本标准全文强制,本标准代替GB 15193.11-1994《果蝇伴性隐性致死实验ル,本标准与GB 15193.11—1994相比主要修改如下:,——在“范围”中增加了:食品生产、加工、保藏、运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的,化学,生物和物理因素.检验对象包括食品添加剂（含营养强化剂）、食品新资源及其成分、新资,源食品,辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备丒洗涤剂,消毒剂、农药残留、兽药残,留、食品工业用微生物等;,——将“剂量及分组”改为与“操作步骤”并列的一章;,----在剂量及分组中.增加了“如果受试物毒性较小，受试物加入饲料的最大剂量可占饲料的5% ロ,阳性对照物可用甲基磺酸乙酯、甲基磺酸甲酯、Nー亚硝基二甲胺、,——在“操作步骤”中,增加了“受试物配制、,自本标准实施之日起.GB 15193. 11—1994同时废止,本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口甲,本标准起草单位:浙江医科大学、上海铁道医学院,本标准主要起草人:徐惟安、叶恩赐、祝慧娟、历曙光O,本标准于!994年首次发布.本次为第一次修订,78,GB 15193.11—2003,木蝇伴性隐性致死试验,1范围,本标准规定了果蝇伴性隐性致死试お的基本技术要求,本标准适用于评价食品生产、加工、保藏、运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的化学、,生物和物理因素的遗传毒性§检验对象包括食品添加剂(含营养强化剂八食品新资源及其成分、新资源,食品、辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备、洗涤剂、消毒剂、农药残留丒兽药残留、食品工业,用微生物等,2原理,2. 1隐性基因在伴性遗传中的交叉遗传性,即雄蝇的X染色体传给艮代雌蝇,又通过F1代传给居,代雄蝇,2.2位于X染色体上的隐性基因能在半合型情况下于雄蝇中表现出来,据此丒利用眼色性状由X染色体上的基因决定中并与X染色体的遗传相关联的特征来作为观察在,X染色体上基因突变的标记ワ故以野生型雄蝇(红色圆眼,正常蝇)染毒ア与Basc(Mulbb5)雌蝇(淡杏色,棒眼,在两个X染色体上各带ー个倒位以防止B代把处理过的父系X染色体和母系X染色体互换)交,配す如雄蝇经受试物处理后.在X染色体上的西因发生隐性致死,则可通过上述两点遗传规则于&代,的雄蝇中表现出来,并籍眼色性状为标记来判断试验的结果.即根据孟徳尔分类反应产生四种不同表,型的F2代,有隐性致死时在玲代中没冇红色圆眼的雄蝇,3仪器与试剂,3. 1仪器与器材设备,电热恒温干燥箱、生化培养箱、立体解剖显微镜、放大镜、空调机、麻醉瓶，牛奶瓶、大小玻璃试管,(3 cm X 8 cmヽ2 cm X 9 cm)、试管盘及架、白瓷板セ海绵垫丒毛笔、海绵塞口,3.2 试剂,乙醛、75%乙醉、丙酮、吐温,3.3 培养基的制备,大小试管和海绵塞洗净后于120℃ 2 h干燥消毒后备用.,3.3 . 1蔗糖26 g、酵母粉4 gワ加水150 mLo,3, 3. 2 玉米粉34 g、酵母粉4 g ,加水150 mb.,3.3.3步骤:按3. 3.1煮沸溶解后再按3. 3.2倒人混匀、煮沸,然后加丙酸2 mL搅匀ナ分装于试管内.,备用,4实验动物,果蝇a雄蝇用3天~4天龄的野生型黑腹果蝇⑴ザス3ガ4レ泡山?wgロ亢”)ナ雌蝇用Basc(Muller-5),品系3天.5天龄的处女蝇,5剂量及分组,按常规方法求出或LDw值。然后按!/2 LC?或Lユ门为大剂量」/5LD由.1/10 IJ%为小剂,帚、另设阴性(或溶剂)及阳性(2 mmol/L MMS)对照组。如果受试物毒性较小タ受试物加入饲料的最大,79,GB 15193.11—2003,剂量可占饲料的5%°阳性对照物可用甲基磺酸乙酯、甲基磺酸甲酯、Nー亚硝基二甲胺,6操作步骤,6. 1受试物配制,一般受试物应溶解在水中.如受试物不溶于水,可用食用油、医用淀粉、装甲基纤维素等配成乳化液,或悬浮液,然后再在给样前用水或生理盐水稀释。避免用二甲基亚砚作为介质。受试物应于灌胃前新,鲜配制.除非有资料表明以溶液（或悬浊液、乳浊液等）保存具有稳定性,6.2 处女蝇的收集,开始羽化后,清除管内所有成蝇,然后在6 h.12 h内收集的雌蝇即为处女蝇口将处女蝇放入新试,管,ー只管中不超过25只,以免过分拥挤,6.3 接触受试物,受试物接触方法常用溶液饲养。受试物溶解后用1%~5%的蔗糖水稀释成不同浓度,试管内放入,ー团手纸,加入1 mL受试液使纸充分湿透,放入经饥饿4 h的雄蝇进行喂饲,新配制的培养基冷却到,55じ时,倒入受试物,快速磁搅拌2 min,接触受试物时间1天.3天〇,6.4 交配程序及方法,为检测受试物对哪一期生殖细胞最敏感ヤ将雄蝇在接触受试物后按2—3—3天间隔（分别表示对精,子、精细胞和精母细胞的效应）与处女蝇交配。即每ー试管以ー只经处理过的雄蝇按上述程序顺次与,2只处女蝇交配.再以所产F1代按雌与雄（1 ： 1或1 ： 2）进行F2交配。12天.14天后观察F2,代,孵育温度为25セ〇,每ー个实验组至少应有3 000个样本数0,7数据处理,根据受试染色体数（即B代交配的雌蝇数减去不育数和废管数）与致死阳性管数……
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